Wéi fréiere se eng Bakterielle Kultur (Lyophilization)

Lyophilization, oder Gefriergrack ass eng kuerz Laboratioun

D'Gefillungstrock, déi och Lyophiliséierung oder Kriodesekcatioun genannt gëtt, ass de Prozess vum Waasser aus engem ewechzehuelen, nodeems et gefruer ass (an dann an engem Vakuum platzéiert), wat Eis erreeche kann aus engem festen zu engem Damp schwätzen, ouni sech duerch eng flësseg Phase auszeginn. Eis (oder aner gefruerene Léisungsmëttel) ginn aus engem Produkt duerch den Ofwierkungsprozess ofgeschnidden a gebonnech Waassermolekülen duerch den Desorptiounsvirgangsentfernung entfernt.

D'Basics vu Lyophilization

Ee vun de beschte Weeër fir e bakterielle, Pilz-, Hefeg oder aner Mikroorganismus Kultur fir laang Period ze späicheren ass de Prozess vu Gefriertréngung ze benotzen. Dës kuerzt Labo-Prozedur kann mat engem kommerziell verfügbaren Gefriergrock getratt ginn, deen Är Kulturammlung behält. Well d'Lyophilisatioun as déi komplexste a teuer Form vun Drëchen ass, ass de Prozess normalerweis op delikat, wärmegeschnidde Material mat héigen Wäert beschränkt. Substanzen, déi net duerch Gefriess beschiedegt ginn, kënnen normalerweis lyophiliséiert ginn, sou datt d'Kältespäicher net noutwendeg ass.

Dëse Prozess kann esou laang wéi dräi Stonne sinn, a soulaang 24 Stonnen, net d'Kulturzäiten.

De Schrëtt-by-Schrëtt-Prozess vu Lyophilization

1. Als éischt wuessen d'Nuechtkultur, oder den Lawn, vum Mikroorganismus op LB oder aner enger adequat Nährstoffagarplat.

2. Niewent der Preparatioun vun der Sterile Crimp-Cap-Vials mat Autoclaven viru Kéiers, mat de Kappen (Gummistopfer) opgeléist looss. Plazpapieretikett mat der Identitéit vum Kulturhaus ausgedréckt an d'Tubaks virun der Autoklavéierung gedréckt. Alternativ benotzt Röhren mat Kappen fir Sterilitéit entwéckelt .

1. Bitt 4 mol Lyophiliséierung Puffer no der Platte. Wann néideg, kënnen d'Zellen mat enger sterile Glasstab suspendéiert ginn.

2. Schnell transferéiert d'Kultiouns Suspension op déi steriliséierter Vials. Bitt ca. 1,5 ml pro Fläsch. D'Seill mat der Kautschukkappe.

3. Frësst d'Kriisverduktioun an de Fläschelen, andeems d'Fleeschkriibs an e -20 ° C Celcius fraser stinn.

1. Wann d'Kulturen gefruer sinn, de Friess-Trockner virbereeden andeems en et Zäit mécht fir d'passende Temperatur an d'Vakuverecht ze stabiliséieren. Maacht dat geméiss dem Instruktioune wéi déi speziell Mark vu Gefriertrott Dir benotzt.

2. Vorsichtlech a aseptesch plazéiert d'Flaschenkapsel loosen op d'Vialsen, sou datt d'Feuchtigkeit beim Gefriergutt drénken kann flüchten, a plazéiert d'Fläsch an eng Gefriertroutkammer. Fëllt d'Vakuum an d'Kammer op d'Instruktioune vum Instruktioun op.

3. Loosst d'Kultur Zäit fir sech ganz lyophiliséieren (dréchen aus). Dëst kënnt vu ville Stonnen bis Iwwernuechtung, jee no dem Volume vun all de Probe a wéi vill Probabilitéiten Dir hutt.

4. Probéiert d'Probabel aus der Gefriergetréierkammer geméiss den Instruktioune vum Instruktioun unzebrenzen an d'Faarwe mat den Kautschukkappen un d'Gummibasket unzeginn an dach d'Crimpen iwwerholl.

5. Léiert d'lyophiliséierter Kulturammlung bei Raumtemperatur.

Produkter Dir braucht Dir

• Gefill dréchen
• Nährstoff oder aner passend agar Placken (an Inkubator fir Kultur ze wuessen)
• Glass Rod
• Lyophiliséierungspuffer
• Crimp-Top-Fläschelen mat Gummistopperen (an e Kritär fir d'Kappen opzehalen)
• Gefill

<sub>Referenz:

SP Wëssenschaftlech. Grondprinzip fir d'Gefill vu Wäsche. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>