Wat Vektoren mat Genen maachen a Klonen maachen
Am molekulare Klonen ass de Vecteur e DNA Molekül, deen als Träger fir d'Transfere oder Insertion vun auslänneschen Gelen (en) an eng aner Zelle kënnt, wou et kann reprochéiert a / oder ausgedréckt ginn. Vektoren gehéieren zu den essentiellen Instrumenter fir Gen Klonéieren an sinn am meeschten nëtzlech, wann si och eng Art Marker-Gëfteg encoding encoding en Bioindikator-Molekül, deen an enger biologescher Evaluatioun gemooss gëtt fir hir Insertioun a Ausdrock am Gewéinlechen Organismus ze garantéieren.
Spezifesch ass en Klonementvektor DNA aus engem Virus, Plasmid oder Zellen (vu méi héijen Organismen) geholl, déi mat engem Fremd-DNA-Fragment fir Klonen Zwecker agesat ginn. Well den Klonvektor kaaftbar an engem Organismus stabil bleiwen, enthält de Vecteur och Features, déi d'praktesch Insertion oder d'Entfernung vu DNA erlaben. Nodeems de Cloning-Vektor klonéiert gouf, kann de DNA-Fragment weider Ënnerkonstrukturen an engem anere Vektor ginn, deen och nach méi spezifesch benotzt kënne ginn.
A ville Fäll ginn Virbereedungen benotzt fir Bakterien ze bilden. Dës Virdeeler si genannt Bakteriophagen, oder Phage, fir kuerz. Retroviren sinn exzellente Vektoren fir d'Gene an Déierzellen z'entwéckelen. Plasmiden, déi kreesfërmlech Stécker vun der DNA sinn, sinn déi am meeschte verbreetent Vektoren déi benotzt friem eng DNA an bakterielle Zellen. Si trauen oft Antibiotikaresistenzgen, déi benotzt kënne fir d'Expression vun der Plasmid-DNA ze testen, op Antibiotikum Petri Placken.
Genee Vergëftung zu Planzenzellen gëtt allgemeng duerch de Bakterium Agrobacterium tumefaciens , wat als Vektor wirkt a benotzt e grousst Plasmid an d'Wirtszelle. Nëmmen déi Zellen, déi den Klonvektor enthalen, wuessen wann Antibiotike present sinn.
Déi grouss Majoritéite vu Klonen Vektoren
Déi sechs Haaptarten vun Vektoren sinn:
- Plasmid. Ronderëm extrachromosomal DNA, déi autonom an der Bakterienzell replizéiert. Plasmiden hunn normalerweis eng héich Kopie vun Zuelen, wéi pUC19 déi eng Kopie vun 500-700 Exemplaren pro Zelle hunn.
- Phage. Linear DNA Molekülen ofgeleet vu Bakteriophage-Lambda. Kann duerch déi auslännesch DNA ersetzt ginn ouni säin Liewenszyklus ze stéieren.
- Cosmids. En aneren zirkuläre extrachromosomal DNA Molekül, deen d'Feature vun Plasmiden a Phage kombinéiert.
- Bakteriell Kärtemos Chromosomen. Baséierend op bakterielle Mini-F Plasmide.
- Yeast Artificial Chromosomen. Dëst ass en künstlechen Chromosom, deen Telomer (enthalen Puffer an den Enden vun Chromosomen, déi aus der Zell Division ofgeschnidden ginn), mat Replikéieren opfänken, en Hefe-Centromere (Deel vun engem Chromosom, wat Schwëster Chromatiden oder Dyad) ass, an e wählbaren Marker fir Identifikatioun an Hefezellen.
Mënschleche kënschtleche Chromosom. Dës Zort vu Vectro ass potentiell nëtzlech fir d'Genuessung an d'mënschlech Zellen, e Mëttel fir Expressionstudien an d'Bestimmung vu mënschleche Chromosomen. Et kann ganz grousst DNA Fragment trauen.
All Ingenieurvektoren hunn en Urspronk vun der Replikatioun (e Replicator), eng Klonerplaz (an där d'Insertioun vun auslännescher DNA keng Replikatioun oder Inaktivatioun vun essentiellen Markéierter stéiert), an e wählbaren Marker (typesch e Gen, deen e Resistenz fir en Antibiotikum ubelaangt.)