Dës Puffer kënnen fir biologesch Applikatioune bei nawell neutralen pH benotzt ginn
Déi dräi pKa Wäerter fir Phosphorsäure (aus dem CRC Handbuch vun der Chemie a Physik) sinn 2.16, 7.21 an 12.32. Mononatriumphosphat a seng konjugéiert Base, Dinamaterphosphat ginn normalerweis benotzt fir Pufferwierder vu pH-Werten ronn 7, fir biologesch Applikatiounen, wéi hei ze weisen.
Dëse Puffer ass méi schwéier wéi d'TAE an d'TBE-Puffer. Et ass net extrem hart. Einfach duerchschnëttlech sinn. Et sollt ongeféier 10 Minutten daueren bis dës Puffer geheit. Hei ass wéi.
1. Entscheed Iech iwwer d'Puffer-Properties
Virun engem Puffer muss Dir d'éischt wëssen wat Molaritéit du wëlls sinn, wat Volumen fir ze maachen a wat de Wënsch ass. Déi meescht Puffer funktionnéieren am beschten bei Konzentratiounen tëscht 0,1 M an 10 M. Den pH soll innerhalb 1 pH-Eenheet vun der Säure / Konjugat Basis pKa sinn. Fir Verkleiheet ass dës Belaaschtung fir 1 Liter Buffer.
2. Bestëmmen de Verhältnis vu Acid zu Base
Benotzt d'Henderson-Hasselbalch Equatioun (ënnen) fir ze bestëmmen wat e Verhältnis vu Säure bis Basis ass néideg fir e Puffer vum gewënschten pH ze maachen. Benotzt de pKa-Wäert deen am néngsten de Wënsch ass, an de Verhältniss bezitt sech op de Säure-Basis-Konjugatpaar, deen dem pKa entsprécht.
HH Equatioun: pH = pKa + LOG ([Base] / [Acid])
Fir e Puffer 6,14, [Base] / [Acid] = 0.4898
Substitute fir [Acid] a Solve fir [Base]
Déi gewënschte Molaritéit vum Puffer ass d'Zomme vun [Acid] + [Base].
Fir e 1 M Buffer, [Base] + [Acid] = 1 an [Base] = 1 - [Acid]
Duerch d'Ersatzstatioun an d'Verhältnissergleichung kënnt aus Schrëtt 2:
[Acid] = 0,6712 mol / L
Solvéieren fir [Acid]
Benotzt d'Gleichung: [Base] = 1 - [Acid], Dir kënnt berechne fir datt:
[Base] = 0,3288 mol / L
3. D'Säure a Konjugaterbasis vermëschen
Nodeems Dir d'Henderson-Hasselbalch-Gleichung benotzt fir datt Dir e Verhältnisser vun Säure bis Basis benotzt fir Äre Puffer ze nennen, bereet just ënner 1 Liter Léisung mat de korrekten Mounts vun Mononatriumphosphat an Dinatriumphosphat.
4. Prüfen de pH
Benotzt e pH-Sonde fir ze bestätegen, datt de richtege pH fir de Puffer erreecht gëtt. Just wéi just néideg asetzen, andeems Dir Phosphorsäure oder Natriumhydroxid (NaOH) benotzt.
5. Korrekt de Volume
Sidd den gewënschten pH erreecht, bréngt de Volume vum Puffer op 1 Liter. Duerno verdéire de Puffer wéi gewënscht. Dee selwechte Puffer kann verdünnt ginn fir Buffer vun 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M oder eppes ze zwëschen.
6. Rotschléi fir de Buffer
Bedenkt datt pKa net liicht gemooss gëtt op e genau Valeur. Aachtlech aner Wäerter kënnen an der Literatur aus verschiddene Quellen disponibel sinn.
7. Wat Dir braucht
Fir de Puffer ze ginn, brauch Dir dräi Substanzen, an déi aner Materialer sinn Ausrüstung. D'Substanz sinn Mononatriumphosphat, Dinatriumphosphat a Phosphorsäure oder Natriumhydroxid fir de pH anzestellen.
Dir musst och e pH Meter an d'Sonde an adequat Labware brauchen. Dëst beinhalt eng Volumenkolleg, graduéiert Sëlwer, Beecher a Rousen.
Zweetens, Dir musst e Rührender Hotplate brauchen.