Dëse Buffer ass fir DNA-Bewegung studéiert
Dëse Puffer huet eng niddereg Ioneschkeet a kleng Pufferkapazitéit. Et ass am Optimum fir Elektrophorese vu grousser (> 20 kb) Stücke vun der DNA eegent ginn a muss op laang Dauer (> 4 h) Gel geliwwert ginn.
An deem Sënn, Dir kënnt e puer Batcher vum Buffer erachten.
Well de Puffer einfach ass ze maachen an d'Schrëtt schnell ausgefouert ginn, sou datt méi wéi eng Stéck an enger Zäit net besonnesch ze konsuméieren oder schwéier ze zéien. Benotzt d'Instruktioune drënner, da sollt et just 30 Minutte daueren fir de TAE-Buffer ze maachen. Hei ass wéi:
Bereet e Stock Stock Solution vun EDTA
Eng EDTA (Äthylendiamin-Tetraessigsäure) Léisung gëtt virbereet. D'EDTA wäert net ganz an enger Léisung goen, bis de pH un 8.0 ugepasst gëtt. Fir enger 500-Milliliter-Lager Léisung vun 0,5 M EDTA, wäerte 93,05 Gramm EDTA-Dinatriumsal (FW = 372,2) weien. Fir 400 ml Milliliter ofgeleet a Waasser ofrieren an de pH mat Natriumhydroxid (NaOH) ze stellen. Top up d'Léisung op e finalen Volume vu 500 Milliliter.
Fatz erop eng Stock Solution vun TAE
Maacht eng konzentresch (50x) Vorratsléisung vu TAE andeems se 242 Gramm Tris Base (FW = 121,14) waacht an et an ongeféier 750 Milliliter Deyoniséierter Waasser ze lounen.
Viraussiichtlech 57,1 Milliliter vun Glacialsäure an 100 Milliliter vun 0,5 M EDTA (pH 8,0). Nodeems Dir d'Léisung op e finalen Volume vun 1 Liter maacht. Dës Stärapelösung kann bei Raumtemperatur gespäichert ginn. Den pH vun dësem Zwéi gëtt net ugepasst an soll ongeféier 8,5 sinn.
Bereet eng funktionnéiert Solutioun vun TAE
D'Aarbechtsléisung vu 1x TAE-Buffer gëtt gemaach andeems se d'Stärenléisung iwwer 50x an deioniséiertem Waasser verdünnt.
Schlussendstutt Konzentraktioune sinn 40 mM. Tris-Acetat an 1 mM EDTA. De Puffer ass elo fäerdeg fir den Aarm vum Gels z'installéieren.
Wat Dir braucht fir de Buffer
Zënter datt de TAE-Buffer nëmmen e schnelle a einfache Set vu Befehl erfordert, brauch d'Zuel vun Materialer fir et net ze héich. Dir braucht just EDTA-Dinatriumsal, Tris Base a Glacialessigsäure.
De Puffer muss och e pH Meter a Kalibrierstandard erfuerden. Dir musst och 600 Milliliter an 1500 Milliliter Becher oder Flakonspiller wéi och Graduierte-Zylinder hunn. Endlech brauch Dir deyoniséiertem Waasser, Rousebarren, a Rousplitter.
Wrapping Up
Wou plangt Dir de Buedem ze maachen - op enger Schoulplaz, enger Aarbechtplaz oder engem anere Standuert, wéi Ärem Heem? Kuckt d'Inventar un, ier Dir ugefangen hutt ze sëcher datt Dir all déi uewe genannten Materialien fir den TAE-Buffer hutt.
Wann Dir léiwer net fir Materialien bezuelen musst, da gitt de Buet ausserhalb vun Äert Heem unzeruffen. Dir kënnt d'Material benotzen einfach online bestellen oder e Fachgeschäft opmaachen.