Et ginn verschidden Zorten, déi benotzt kënne ginn fir d' DNA ze visualiséieren an ze photographéieren, nodeems d'Material mat Gelelektrophoresis getrennt gouf. Ënnert deene villen Choix sinn dës fënnef Stämme de gréissten Ufank mat Ethidiumbromid, wat am meeschte benotzt gëtt. Wann Dir mat dësem Prozess geschafft gëtt, ass et wichteg, net nëmmen d'Differenzen tëschent de Stämme kennen ze kennen, mee d'inherent Gesondheetsrisiken.
01 Ethidium Bromid
Ethidiumbromid ass méiglecherweis de bekannteste Fënstere fir DNA ze visualiséieren. Dëse Farbstoff kann an der Gel Mëschung benotzt ginn, am Elektrophoresepuffer oder op d'Färze vum Gel, nodeems et geschitt ass. Molekulele vum Fändel adhere mat DNA Stréid a fluoreszitt ënnert UV-Liicht, a weist Iech genau, wou d'Banden am Gel sinn. Trotz sengem Virdeel ass de Nodeur datt Ethidiumbromid e potenziell Karzinogen ass, dofir muss se mat grousser Sorgfalt behandelt ginn. Wéinst der potentiell gesondheetlech Risikoe mat der Operatioun mam Gel, sinn Alternativen fonnt ginn. 02 SYBR Gold
SYBR Goldféiwer kann benotzt ginn fir doppel oder enger bestëmmter DNA ze flecken oder RNA ze schneiden. SYBR Gold war ee vun den éischte Alternativen zu Ethidiumbromid fir de Maart ze schéissen an et ass méi sensibel wéi Ethidiumbromid. Dee Féiwer huet 1000 Fuedere méi UV-Fluoreszenz, wa se an Nukleinsäuren gebonnen ass. Et penetréiert dann déck an héich Prozentsait agaréis Gele a kann an Formaldehyd Gele benotzt ginn. Well d'Fluoreszenz vum ongebonnen Molekül esou déif ass, gëtt et net ze erfuerden. Lizenzhalter Molekulare Proben hunn och (zanter dem Start vun SYBR Gold) entwéckelt a vermaart SYBR Safe an SYBR Green déi méi sécherer Alternativen zu Ethidiumbromid sinn.
03 SYBR Green
Déi SYBR Green I an II Flecken (nees, mol duerch molekulare Proben) vermarktet ginn fir verschidden Zwecker optiméiert. Well se an d'DNA bindelen, sinn se nach ëmmer als potentiell Mutagens ugesinn a si sollen duerch Suergfalt ëmgeleet ginn. SYBR Green I ass méi empfindlech fir d'Benotzung mat doppelsträngend DNA z'informéieren, während SYBR Green II, op der anerer Säit, am beschten ass fir ze benotze mat nëmmen enger bestëmmten DNA oder RNA. Wéi déi populär Ethidium Bromide Fleesch, sinn déi héich sensibel Flecken am UV-Liicht. 04 SYBR Safe
SYBR Safe gouf entwéckelt fir eng méi sécher Alternativ zu Ethidium Bromid an aner SYBR Flecken. Et ass net als geféierlech Offall gesi ginn an allgemeng kann duerch d'regelméisseg Kanalisatiounssysteme (dh d 'Down Drain) entsuergt ginn, well d'Toxizitéit Tester uginn datt et keng akut Toxizitéit gëtt. De Test weist och datt et wéineg oder guer keng Genotoxizitéit op syrescher Hamster Embryo (SHE) Zellen, mënschlech Lymphozyten, Maus-Lymphomzellen an am AMES-Test ass. De Fleck kann mat engem blueweisegen Transiluminator benotzt ginn, wat manner Schued bei der DNA visualiséiert a bessert Effizienz fir spéider Klon. 05 Eva Green
Eva Green ass e grénge Fluorescentfär, deen fonnt gouf fir PCR ze reduzéieren als aner Faarf. Dat mécht et ganz nëtzlech fir Programmer wéi quantitativ Echtzäit PCR. Et ass och e gudde Choix wann Dir d'Gell-Schmelzpunkt Gele fir d'Genesung vun der DNA benotzt. Et ass ganz stabil bei héijen Temperaturen an huet ganz kleng Fluoreszenz op eegene, awer ass extrem fluoreszitt wann se an d'DNA gebonnen ass. Eva Green huet och bewisen, datt si ganz kleng oder guer keng Zytotoxizitéit oder Mutagenizitéit hunn.