Mesure Enzym Kinetik
Als e bësse Background, Enzyme sinn Proteine déi als Katalysatoren féieren, fir d'Aktivitéitstabilitéit fir eng Reaktioun opzemaachen. D'Energie vun der Energie ass d'Energie, déi erfuerderlech Reaktiounen huet "ugefaangen" ze hunn, well vill Reaktiounen séier net schnell (oder si geschéien) wann se thermodynamesch méiglech sinn.
Enzyme katalyséieren spezifesch Reaktiounen op enger bestëmmter Plaz (bekannt als den aktive Site), wou d'Reaktanten bindelen an reagéieren op d'Erzeugung vun de Produkter. Substrate hunn aktive Siten déi spezifesch sinn nëmme fir si, datt keng aner Substanzen an der selwechter Site bannen oder reagéieren. Wéi en Schlëssel a Schlëssel wäert all Enzym nëmmen eng spezifesch Reaktioun (mat e puer Ausnahmen) katalyséieren.
Spezifesch Aktivitéit gëtt bei Protein-Isolatiounsmethoden benotzt fir den Prozentsatz vun der Reinigung ze weisen. Et ass wichteg, dës Eenheet beim Kaizen Enzyme ze wëssen, fir genau wéi vill vum reinen Enzym Dir kënnt kréien.
Wann d'Enzym Kinetik gemooss gëtt (déi Taux vun der Reaktioun vun engem Enzym mat engem Substrat - oder Uewerfläch) gëtt spezifesch Aktivitéit definéiert als d'Substratmenge definéiert d'Enzym (Reaktioun katalyséiert) pro mg Protein am Enzympräparatioun pro Zeiteinheit.
E Beispill vu spezifeschen Aktivitéiten wären:
- D'spezifesch Aktivitéit vum isoléierte Enzym gouf bei 150 μol / min / mg Protein gemooss, ier d' Reinigung bestätegt a 800 800 / Mill / mg / mg.
Spezifesch Aktivitéit ass e wichtege Mooss vum Enzym Reinheet. Verschidde Stécker vun engem reinen Enzym mussen déi selwecht Wäerter hunn an och eng Enzym-Léisung méi oft ze verdéiwen identesch spezifesch Aktivitéitswerte, obwuel ett aner Enzymaktivitéitswerte sinn. Dëst ass wéinst der Berechnung vu spezifescher Aktivitéit, de Zuelen (Eenheeten / ml) an den Nenner (mg / ml), egal op.
Spezifesch Aktivitéit ass ganz anescht wéi Aktivitéit, awer d'Berechnung vu spezifeschen Aktivitéiten hänkt nach ëmmer vum Aktivitéitswert ab. Dëst bedeit datt den definéierte spezifeschen Aktivitéitswert ofhängeg vun der Definitioun vum Enzym.
Charcë vun Enzymen déi méi wéi erwuessene spezifesch Aktivitéitswert hunn hunn Enzym-Molekülen, déi geännert ginn oder gemëscht mat Verierunge sinn enthale sinn.
Faktoren Affären vun der Enzymaktivitéit
Et ass méiglech, datt een Enzym verschidde gemoossene Aktivitéitswert hunn, gemengt an ënnerschiddleche Laboe (dh realen Differenzen an der gemoed Aktivitéit, net onbekend Differenzen, déi duerch d'Benotzung vun ënnerschiddleche Undefinitionen) verursaacht ginn.
De Wee wéi en Tester gemaach gëtt (d'Methode vum Test fir d'Reinheet vun Enzymen ze bestëmmen) beaflosst d'Aktivitéit Wäerter. Zum Beispill, Enzyme sinn allgemeng méi aktiv tëscht Temperaturen vu 37 Grad Celsius am Verglach mat 20 Grad Celsius, also wann een Tester bei 21 Grad Celsius ausgeübt gëtt, variéieren d'Wäerter vun den Assays, déi bei enger Temperatur vu 32 Grad Celsius gemaach ginn (typesch , Assays gi bei enger Temperatur tëscht 20-37 Grad Celsius gemaach.
Dofir ass d'Definitioun vun der Enzyminitéit besser ausgedréckt ginn als 1 Eenheet (U) ass d'Quantitéit vum Enzym, déi d'Reaktioun vun 1 nmol Substrat pro Minute ënner Standardbedingungen katalyséiert.